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金相显微镜成像原理简介
  1. [日期:2014-04-28 查看次数:4082]
1.金相显微镜的成像原理,
金相显微镜的成象放大部分主要由两组透镜组成。靠近观察物体的透镜叫物镜,而靠近眼睛的透镜叫目镜。通过物镜和目镜的两次放大,就能将物体放大到较高的倍数,见图1,显微镜的放大光学原理图。物体AB置于物镜前,离其焦点略远处,物体的反射光线穿过物镜折射后,得到了一个放大的实象A1B1,若此象处于目镜的焦距之内,通过目镜观察到的图象是目镜放大了的虚象A2B2。

2.金相显微镜的放大倍数
物镜的放大倍数M物=A1B1/AB≈L╱F1
目镜的放大倍数=A2B2/A1B1≈D╱F2
两式相乘:M物×M目=A1B1/AB×A2B2/A1B1=A2B2/AB
=L╱F1×D╱F2=L×250╱F1×F2=M总
式中:L—为光学镜筒长度(即物镜后焦点到目镜前焦点的距离)
F1—物镜的焦距。  F2—目镜的焦距
D—明视距离(人眼的正常明视距离为250mm)
即显微镜总的放大倍数等于物镜放大倍数和目镜放大倍数的乘积。一般金相显微镜的放大倍数最高可达1600到2000倍。
由此可看出:因为L光学镜筒长度为定值,可见物镜的放大倍数越大,其焦距越短。在显微镜设计时,目镜的焦点位置与物镜放大所成的实象位置接近,并使目镜所成的最终倒立虚象在距眼睛250毫米处成象,这样使所成的图象看得很清楚。
显微镜的主要放大倍数一般通过物镜来保证,物镜的最高放大倍数可达100倍,目镜的最高放大倍数可达25倍。放大倍数分别标注在物镜和目镜各自的镜筒上。在用金相显微镜观察组织时,应根据组织的粗细情况,选择适当的放大倍数,以使组织细节部分能观察清楚为准,不要只追求过高的放大倍数,因为放大倍数与透镜的焦距有关,放大倍数越大,焦距越小,会带来许多缺陷。
3.透镜象差:
透镜象差就是透镜在成象过程中,由于本身几何光学条件的限制,图象会产生变形及模糊不清的现象。透镜象差有多种,其中对图象影响最大的是球面象差、色象差和象域弯曲三种。
显微镜成象系统的主要部件为物镜和目镜,它们都是由多片透镜按设计要求组合而成,而物镜的质量优劣对显微镜的成象质量有很大影响。虽然在显微镜的物镜、目镜及光路系统等设计制造过程中,已将象差减少到很小的范围,但依然存在。
(1)球面象差:
1)产生原因:球面象差是由于透镜的表面呈球曲形,来自一点的单色光线,通过透镜折射以后,中心和边缘的光线不能交于一点,靠近中心部分的光线折射角度小,在离透镜较远的位置聚焦,而靠近边缘处的光线偏折角度大,在离透镜较近的位置聚焦。所以形成了沿光轴分布的一系列的象,使图象模糊不清。这种象差称球面象差,见图2所示。

2)校正方法:
a 采用多片透镜组成透镜组,即将凸透镜与凹透镜组合形成复合透镜,产生性质相反的球面象差来减少。
b 通过加光栏的办法,缩小透镜的成象范围。因球面象差与光通过透镜的面积大小有关。
在金相显微镜中,球面象差可通过改变孔径光栏的大小来减小。孔径光栏越大,通过透镜边缘的光线越多,球面象差越严重。而缩小光栏,限制边缘光线的射入,可减少球面象差。但光栏太小,显微镜的分辨能力降低,也使图象模糊。因此,应将孔径光栏调节到合适的大小。
(2)色象差:
1)产生原因:色象差的产生是由于白光是由多种不同波长的单色光组成,当白光通过透镜时,波长愈短的光,其折射率愈大,其焦点愈近。而波长越长,折射率越小,其焦点愈远,这样一来使不同波长的光线,形成的象不能在同一点聚焦,使图象模糊所引起的象差,即色象差。见图3所示。
2)校正方法:可采用单色光源或加滤色片或使用复合透镜组来减少。

(3)象域弯曲:
1)产生原因:垂直于光轴的平面,通过透镜所形成的象,不是平面而是凹形的弯曲象面。称象域弯曲。见图4所示。
2)校正办法:象域弯曲的产生,是由于各种象差综合作用的结果。一般的物镜或多或少地存在着象域弯曲,只有校正极佳的物镜才能达到趋于平坦的象域。

4.物镜的数值孔径
物镜的数值孔径用NA表示(即Numderical Apertuer),表示物镜的聚光能力。数值孔径大的物镜,聚光能力强,即能吸收更多的光线,使图象更加明显,物镜的数值孔径NA可用公式表示为:
NA=n·sin φ
其中:n—是物镜与样品间介质的折射率
φ—通过物镜边缘的光线与物镜轴线所成角度,即孔径半角。
可见,数值孔径的大小,与物镜与样品间介质n的大小有关,以及孔径角的大小有关。见图5所示。

当物镜与物体之间的介质为空气时,
光线在空气中的折射率为n=1,
若物镜的孔径半角为30º,
则数值孔径为:
NA=n sinφ=1×sin30º=0.5
若物镜与物体之间的介质为松柏油时,
介质的折射率n=1.52,
则其数值孔径为:
NA=n sinφ=1.52×sin30º=0.76 
物镜在设计和使用中,指定以空气为介质的称干系物镜或干物镜,以油为介质的称为油浸系物镜或油物镜。干物镜的n=1,sinφ值总小于1,故数值孔径NA小于1,油物镜因n=1.5以上,故数值孔径NA大于1。物镜的数值孔径的大小,标志着物镜分辨率的高低,即决定了显微镜分辨率的高低。
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